水貂细小病毒IgG抗体间接ELISA半定量检测方法的初步建立
文献类型: 中文期刊
作者: 朱翔宇;蔡熙姮;鲁荣光;卜研;柏玲;朱言柱;廉士珍;白雪;闫喜军;胡博
作者机构:
关键词: 水貂细小病毒 ; VP2蛋白 ; 可溶性蛋白 ; 间接ELISA
期刊名称:中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2021 年 41 卷 04 期
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 通过建立一种检测水貂细小病毒(mink enteritis virus, MEV)IgG抗体的间接ELISA方法,旨在为MEV感染检测与免疫效果评价提供技术手段。以纯化的重组MEV VP2蛋白作为包被抗原,以HRP-羊抗雪貂IgG为二抗,通过优化反应条件,建立了检测MEV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性、敏感性及重复性试验;通过临床样品检测评价ELISA方法与HI试验的符合率,制备阳性参考品并设定酶联免疫单位(enzyme immune units, EIU)的计算方法,以测定样品中抗MEV IgG抗体的相对含量,分析ELISA方法检测血清特异性IgG抗体水平与中和抗体的相关性。结果显示,ELISA方法的最佳抗原包被质量浓度为1.425 mg/L,待检血清和酶标抗体的工作浓度分别为1∶80与1∶2 000倍稀释。结果表明,该ELISA方法能够特异地检测MEV抗体,与水貂犬瘟热病毒(canine distemper virus, CDV)、水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus, ADV)的抗血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数低于5%,血清特异性IgG抗体水平与中和抗体效价之间存在线性关系,呈显著的正相关(r=0.946 1,P<0.001)。
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