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小反刍兽疫病毒H和N蛋白的表达及抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 孟庆玲;乔军;倪伟;才学鹏;骆学农

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;血凝蛋白;核蛋白;表达;抗体制备

期刊名称：中国病原生物学杂志

ISSN： 1673-5234

年卷期： 2010 年 09 期

页码： 645-648+644

收录情况： CSCD

摘要： 目的表达小反刍兽疫病毒(PPRV)疫苗株血凝蛋白(H)和核蛋白(N)并制备其抗体。方法利用RT-PCR技术扩增PPRV H和N蛋白基因进行序列分析,并分别克隆入pET-28a(+)原核表达载体中,构建重组载体pETH和pETN;重组载体分别转化E.coli BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。结果 PPRV疫苗株H和N基因ORF全长分别为1 830 bp和1 578 bp,分别编码609个和525个氨基酸。经IPTG诱导6 h后,H和N蛋白基因片段在大肠埃希菌中均获得了高效表达,表达的重组蛋白均具有良好的抗原性。分别用纯化的H和N重组蛋白免疫昆明系小鼠,获得的抗体效价分别为1∶16~1∶32和1∶32~1∶64。结论成功表达了PPRVH和N蛋白并制备了相应抗体,为研发PPRV检测试剂奠定了基础。

分类号： S852.65

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