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青花菜侧枝调控基因BoBRC1的克隆及功能分析

文献类型： 中文期刊

作者： 刘宇香;韩风庆;赵鑫雨;刘玉梅;李占省;方智远

作者机构：

关键词： 青花菜;CRISPR/Cas9;基因克隆;功能分析;BoBRC1;侧枝调控

期刊名称：园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2024 年 51 卷 09 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 从青花菜优良自交系L461中克隆了BoBRC1，表达模式分析表明其在腋芽组织中表达量最高，并随腋芽生长动态变化。根据其基因序列，在第1个外显子上设计2个靶标，构建CRISPR-Cas9基因编辑载体，通过农杆菌介导的遗传转化法导入自交系L461中，获得18个阳性株系。测序结果显示，有3个株系在至少1个靶标处发生了基因突变，编辑效率为16%。其中L461-3株系在靶标1和靶标2均发生编辑事件，L461-1和L461-11株系仅在靶标2处发生编辑事件。与野生型相比，T1代纯合突变体侧枝数明显增加，侧枝长度变长。对bobrc1纯合突变体中侧枝发育基因BoBRC1下游关键基因进行qRT-PCR分析发现，BoHB21、BoHB53、BoNCED3基因表达量显著降低，BoHB40基因表达量显著增高。以上研究结果证实了BoBRC1基因参与青花菜侧枝发育调控，敲除该基因可促进青花菜侧枝生长。

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