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Zbed6基因敲除对小鼠骨骼肌生长发育的影响及其分子作用机制研究

文献类型： 中文期刊

作者： 刘铃;王圣楠;王丹丹;马月辉;蒋琳;崔凯

作者机构：

关键词： 锌指BED结构域包含蛋白6;骨骼肌;生长发育;转录组测序

期刊名称：中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2023 年 09 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 【目的】研究锌指BED结构域包含蛋白6（ZBED6）基因敲除对青春期小鼠骨骼肌生长发育的影响及其分子作用机制。【方法】以8周龄野生型（WT）和Zbed6基因敲除(Zbed6-/-)C57BL/6小鼠为试验对象,采集血液,用ELISA法检测血清睾酮含量;分离骨骼肌组织并记录肌肉重、肌肉率。通过骨骼肌组织切片和免疫组化分析检测骨骼肌肌纤维面积及IGF2蛋白表达水平。通过Illumina NovaseqTM 6000高通量测序对WT和Zbed6-/-雌、雄小鼠进行转录组测序分析,联合小鼠ZBED6靶基因数据,筛选在Zbed6基因敲除小鼠肌肉组织中发挥作用的下游靶基因,并通过实时荧光定量PCR验证转录组测序结果中差异表达基因的可靠性。【结果】与WT小鼠相比,Zbed6-/-雌、雄小鼠肌肉重、肌肉率均极显著增加（P＜0.01）。Zbed6基因敲除后,雌、雄小鼠骨骼肌Zbed6基因mRNA表达量显著降低（P＜0.05）,IGF2的mRNA及蛋白表达量均显著或极显著增加（P＜0.05;P＜0.01）,血清睾酮含量极显著升高（P＜0.01）。转录组测序结果显示,Zbed6-/-组雄鼠骨骼肌中共筛选到38个差异表达基因,其中22个上调,16个基因下调;雌鼠骨骼肌中筛选到49个差异表达基因,其中19个基因上调,30个基因下调。共有10个差异表达基因在雌、雄小鼠中共同表达,其中Dock3、Lhx2、Brsk2、Caskin1、Gbe1为ZBED6靶基因。实时荧光定量PCR检测发现,4个差异表达基因的表达情况与转录组测序分析结果一致,证实测序结果准确可信。【结论】Zbed6-/-促进青春期小鼠骨骼肌生长发育,增加血清睾酮含量,筛选出Dock3、Lhx2、Brsk2、Caskin1、Gbe1 5个ZBED6靶基因。研究结果为深入探究ZBED6功能提供了新的基因靶点和研究方向,有助于完善ZBED6功能图谱,为大动物品种改良和畜禽瘦肉性状遗传育种研究提供了重要的理论依据。

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