猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因的表达及其单克隆抗体的制备
文献类型: 中文期刊
作者: 刘金霞;周艳君;安同庆;仇华吉;王云峰;童光志
作者机构:
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;rtGP3;单克隆抗体
期刊名称:中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2007 年 27 卷 05 期
页码: 609-612
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株的GP3蛋白基因进行截短修饰后,克隆于pGEX6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGE检测,融合表达的蛋白rtGP3大小约40 000;Western blotting分析证实,表达的融合蛋白rtGP3能被PRRSV阳性血清所特异性识别。收获融合表达的rtGP3,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以表达的融合蛋白rtGP3和GST蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA方法对融合细胞的上清液进行检测,结果获得了5株能稳定分泌抗rtGP3蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为31A2,31G11,32B12,32D4和32H7。利用PRRSV感染的Marc-145细胞进行间接免疫荧光检测显示,所获得的5株单克隆抗体均能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光。亚型鉴定结果表明,5株单克隆抗体均为IgG1型,且轻链均为κ链。
分类号: S852.65
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