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中国荷斯坦奶牛IL-18基因的克隆与真核表达研究

文献类型： 中文期刊

作者： 乔军;孟庆玲;陈创夫;才学鹏;刘佳旭;任艳;张辉

作者机构：

关键词： 白介素-18基因;克隆;真核表达;中国荷斯坦奶牛

期刊名称：江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2009 年 04 期

页码： 49-52

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了克隆并表达中国荷斯坦奶牛白介素18(interleukin,IL-18)基因,用牛白介素18基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后荷斯坦奶牛外周血单核细胞(PBMCb)总RNA进行RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定,将目的基因亚克隆到真核表达载体pGFP-C1中,构建了重组质粒pGFP-IL-18,转染BHK-21细胞,检测目的基因是否表达。结果:该基因全长582 bp,编码193个氨基酸,与羊、犬和猪IL-18基因相比,核苷酸序列有较高的同源性,但与小鼠和鸡IL-18基因相比有明显的种属差异,转染48 h后,可在转染细胞胞浆中检测到黄绿色的荧光,表明已成功克隆了中国荷斯坦奶牛IL-18基因,并实现了该基因在真核细胞中的表达。

分类号： S823`Q78

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