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猫传染性腹膜炎病毒N蛋白表达及其多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 刘福康;袁莉刚;张达;汤傲星;刘光清;朱杰

作者机构：

关键词： 猫冠状病毒;猫传染性腹膜炎病毒;N蛋白;基因克隆;原核表达;多克隆抗体

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 本研究旨在体外原核表达猫传染性腹膜炎病毒（feline infectious peritonitis virus， FIPV）SH2021株核衣壳蛋白（nucleocapsid， N），制备兔源多克隆抗体。根据FIPV SH2021株N基因序列设计引物，构建pCold-I-N重组表达质粒。随后，将重组质粒转化至表达感受态细胞BL21（DE3），在终浓度为1.0 mmol·L-1的IPTG和16 ℃的诱导条件下进行表达。最后，利用His层析柱进行纯化，纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。试验结果表明，纯化获得重组N蛋白大小约为45ku，制备的N蛋白兔多克隆抗体效价可达 1∶512 000，该抗体对N蛋白具有良好的反应原性。本研究成功所制备了FIPV N蛋白兔多克隆抗体，该抗体具有良好的反应原性和特异性，为FIPV抗原抗体检测以及研究N蛋白生物学功能研究提供重要工具。

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