猪鼻支原体荧光PCR检测方法的建立和应用
文献类型: 中文期刊
作者: 孙岩;闫丽辉;史林林;关野;刘恒贵;孙建宏
作者机构:
关键词: 猪鼻支原体;荧光PCR;方法建立
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2022 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2021-2022年度) ; ; 科技核心(2021版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为了建立猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)快速荧光PCR检测方法,本研究合成了该病原特异性基因P37的重组质粒,根据该基因设计荧光PCR引物和探针,并对设计的引物和探针的特异性、敏感性和重复性进行了检测。结果显示,该方法具有高度的特异性,除了识别猪鼻支原体基因组外,对猪的基因组和猪常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性试验中,该方法对猪鼻支原体的检测限为1 000 copies/mL,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测临床样本,阳性检出率为76%(38/50),远高于普通PCR的阳性检出率(40%,20/50)。上述结果表明,本研究建立的荧光PCR方法在特异性、敏感性和稳定性方面均满足猪鼻支原体的临床检测要求,可以用于猪鼻支原体临床样品的检测。
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