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猪肺炎支原体P97蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王宁;谨瑾;刘璐;刘欢欢;姜立波;辛九庆;刘恒贵

作者机构：

关键词： 猪肺炎支原体;单克隆抗体;P97蛋白;表位鉴定

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2020 年 NULL 卷 5 期

页码： 1110-1118

摘要： 为了制备能够用于阻断ELISA检测的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的Mhp J株P97蛋白C末端包含R1区的肽段(P97CR1)作为免疫原免疫BALB/C雌鼠,筛选获得一株能稳定分泌抗Mhp P97蛋白MAb的杂交瘤细胞株A3.鉴定结果显示,A3 MAb是IgG1亚类,轻链为κ链.Western blot结果显示A3 MAb能够和原核表达纯化的P97CR1蛋白特异性反应,并且在流式细胞仪分析中能够识别天然的Mhp.通过逐渐截短表达分析该MAb识别的表位序列为LDDNLQ,该抗原表位在Mhp菌株中高度保守.阻断ELISA初步试验结果显示,A3 MAb与蛋白抗原的结合能够被Mhp高免阳性血清阻断.该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的Mhp阻断ELISA检测方法奠定了基础.

分类号： S852.62

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