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盖塔病毒TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 顾志刚;郭洁真;王子涵;孙彤;陈鸿军;孙竹筠;陈丹清

作者机构：

关键词： 盖塔病毒;nsP1;TaqMan探针;实时荧光定量RT-PCR

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 盖塔病毒(GETV)是一种在我国广泛分布的虫媒病毒，可通过蚊虫传播感染人畜，导致猪、马等动物出现发热、出疹及淋巴结肿大等症状，可致妊娠母猪流产或死胎。目前尚无特效治疗方式。本研究根据GenBank公布的盖塔病毒nsP1基因序列，设计3组引物探针，筛选出最佳的引物探针，建立一种灵敏度高、特异性强的针对盖塔病毒的Taqman探针实时荧光定量RT-PCR检测方法。对该方法进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品检测。标准曲线Ct值与相应质粒标准品浓度存在良好的线性关系，相关系数(R2)为0.9989；对含GETV基因的重组质粒pCDNA3.1-nsP1体外转录RNA进行敏感性试验，最低检出限达10copies，是普通 RT-PCR 方法的1000倍，敏感性高；与PRRSV、CSFV与PEDV的核酸不发生交叉反应，特异性好；变异系数小于2%，重复性好。本研究了建立了一种敏感、特异的GETV检测方法，对GETV的快速诊断具有重要意义。

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