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非洲猪瘟病毒pK205R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 王燕;邹艳丽;何佳依;刘珊;苗雨润;任炜杰;王振忠;白昀;陈欢;钱莺娟;贾红;吴晓东;冯志新;郑龙三

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;pK205R蛋白;间接ELISA;杆状病毒表达

期刊名称：畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2025 年 57 卷 02 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒Bacmid-pK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原，优化各项反应条件，建立间接ELISA抗体检测方法，验证方法的特异性、灵敏性、重复性，并对临床血清样品进行检测。结果显示：pK205R蛋白可以与ASFV阳性血清发生发应，ELISA方法的抗原包被浓度为50 ng/孔，4℃过夜包被，封闭液为2%牛血清白蛋白(BSA),37℃封闭1 h,待检血清以5%脱脂乳进行1∶200稀释，37℃孵育0.5 h;二抗工作浓度为1∶5 000,37℃孵育0.5 h, 37℃下显色10 min;该方法的阳性临界值为0.186(≥0.186为阳性，<0.186为阴性),且具有良好的特异性、灵敏性、可重复性，与商品化试剂盒符合率为79.92%。本研究成功建立pK205R非洲猪瘟间接ELISA抗体检测方法，为进一步优化和研制非洲猪瘟抗体的快速检测试剂盒提供了参考。

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