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非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白的原核表达及其免疫特性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 谢振华;刘英楠;张萌;敖清莹;吕璐;于婉琪;扈荣良;邬静;陈鸿军

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;C-type lectin蛋白;抗体;免疫特性

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 51.0 卷 1.0 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为了制备非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18毒株的C-type lectin蛋白多抗,以基因序列优化的真核质粒为模板,扩增EP153R基因,构建原核表达重组质粒pET-32a-EP153R.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,利用IPTG诱导宿主菌表达后,纯化C-type lectin重组蛋白.用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备C-type lectin蛋白多抗,利用Western-blot和间接免疫荧光技术鉴定该抗体的反应性和特异性.结果表明,原核表达重组蛋白C-type lectin经IPTG诱导表达成功,大小约为38 ku,其主要以包涵体形式表达,且能与His标签单抗发生反应,C-type lectin蛋白多抗可特异性识别非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白.本研究为非洲猪瘟血清学检测方法的建立及C-type lectin蛋白生物学功能的探究奠定了基础.

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