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阪崎克罗诺杆菌双抗夹心酶联免疫吸附检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 张欣;王福成;韩先干;祁克宗;宋祥军;董雨豪;蒋蔚

作者机构：

关键词： 阪崎克罗诺杆菌;单克隆抗体;双抗体夹心ELISA

期刊名称：畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2024 年 56 卷 04 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为建立阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)的免疫学快速检测方法，分别制备了阪崎克罗诺杆菌的特异性单抗和多抗，建立阪崎克罗诺杆菌的双抗夹心酶联免疫吸附DAS-ELISA检测方法。结果：获得4株抗阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体阳性细胞株，分泌抗体效价分别是1∶128 000、1∶32 000、1∶256 000和1∶256 000,抗阪崎克罗诺杆菌兔多克隆抗体效价是1∶128 000。建立的阪崎克罗诺杆菌DAS-ELISA检测方法，分别以抗阪崎克罗诺杆菌兔多抗和单抗作为捕获抗体和检测抗体，兔多抗的最佳稀释度为1∶4 000,单克隆抗体最佳稀释度为1∶1 000,灵敏性可达1×106 CFU/mL;该检测方法具有良好的特异性，与常见的6种食源性病原菌都没有交叉反应，且能够同时检测6种克罗诺杆菌属细菌；重复性结果显示，该检测方法的批内批间变异系数均小于15%,具有良好的重复性。综上，利用抗阪崎克罗诺杆菌的单抗和兔多抗成功建立了DAS-ELISA方法，该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，可为阪崎克罗诺杆菌的快速检测提供技术支撑。

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