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密码子优化型鹅细小病毒病毒样颗粒的表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 陈宗艳;李传峰;高景鹏;朱英奇;王玢瑸;杨宗伟;刘光清

作者机构：

关键词： 鹅细小病毒;VP2;密码子优化;杆状病毒表达系统;病毒样颗粒

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2012 年 20 卷 04 期

页码： 1-6

摘要： 根据昆虫细胞密码子的偏嗜性,对鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)VP2基因的密码子进行优化,利用Bac-to-Bac表达系统构建了表达优化VP2基因的重组杆状病毒,通过感染昆虫细胞(Sf9)获得病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)。SDS-PAGE分析显示Sf9细胞中出现了65 kDa的蛋白条带,间接免疫荧光(indirect immunofluorescent assay,IFA)和Western blot结果均证实表达产物能与鼠抗GPV VP2抗体发生特异性反应,说明其具有良好的免疫反应性。同时,试验结果还证明,密码子优化后的GPV VP2基因在昆虫细胞中表达量得到了提高,明显高于野生型VP2基因。透射电镜观察纯化后的昆虫细胞表达产物,可见直径约30 nm的VLPs,表明密码子的优化并不影响VP2蛋白的组装。本研究为进一步研制诊断抗原以及新型GPV疫苗等奠定了基础。

分类号： S852.65

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