数字农科院2.0

犬细小病毒荧光定量PCR检测方法的建立与评价

文献类型： 中文期刊

作者： 李英俊;史利军;李刚;侯绍华;曾妮;章金刚;朱鸿飞

作者机构：

关键词： 犬细小病毒;VP2蛋白基因;实时荧光定量PCR

期刊名称：中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2010 年 30 卷 12 期

页码： 1594-1597

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过序列比对和Blast分析,选定犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)VP2蛋白保守区基因为检测的目的基因,引物采用Primer Premier 5.0软件设计。利用灵敏度较高的TaqMan探针法建立CPV核酸检测方法。通过对标准品的扩增、测序及对标准扩增曲线的绘制,建立CPV核酸检测方法。同时对建立的检测方法进行了检测特异性、灵敏度和重复性分析。将阳性对照标准品进行10倍梯度稀释后可检测到102拷贝/μL样品,表明该检测体系具有较高的检测灵敏度。通过分析表明,本检测方法在用空白对照及类似的猪细小病毒、猪圆环病毒作为扩增对照时,没有发现非特异性产物的产生,表明该体系对于CPV的检测是特异的。通过6次批间重复检测,体系的变异系数小于3%,表明该检测体系具有良好的重复性。

分类号： S858.292

  • 相关文献

[1]MDCK细胞感染犬细小病毒后的差异表达谱分析. 舒龙,彭广能,孙世琪,钟志军,曹随忠. 2012

[2]特异性靶向犬细小病毒融合DNA疫苗的构建及免疫效果的研究. 吴植,郝福星,王永娟,刘洋,王栋,徐州,袁维峰. 2016

[3]犬细小病毒BJ5株分离和VP2序列分析. 王洪林,谭斌,陈微晶,王秀东,武华. 2009

[4]同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、I型和II型犬腺病毒多重PCR方法的建立. 刘大飞,姜一瞳,威亭,程景,刘立奎,林文君,柴洪亮,杨天阔,王翀,华育平,曲连东,张洪英. 2012

[5]鉴别诊断犬细小病毒疫苗毒和野毒株PCR-RFLP方法的建立. 易立,程世鹏,王建科,罗彬,杨莘. 2009

[6]犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析. 林鹏,赵航,王建科,程悦宁,任静强,易立,仝明薇,程世鹏. 2015

[7]FPLV、CPV、MEV非结构蛋白NS1和结构蛋白VP2遗传特征分析. 杨莘,王建科,易立,许红丽,程世鹏,武华. 2011

[8]同时检测犬瘟热病毒、犬细小病毒、Ⅰ型和Ⅱ型犬腺病毒多重PCR方法的建立. 刘大飞,姜一曈,戚亭,程景,刘立奎,林文君,柴洪亮,杨天阔,王翀,华育平,曲连东,张洪英. 2012

[9]犬细小病毒的分离鉴定及核苷酸序列分析. 易立,程世鹏,闫喜军,柴秀丽,罗国良,张海玲,王凤雪,赵建军. 2008

[10]犬细小病毒VP2基因克隆及原核表达分析. 卫巧林,张韵,甄士伟,殷相平. 2016

[11]犬细小病毒JL-M13株的分离鉴定及全基因组序列分析. 仝明薇,易立,程世鹏. 2015

[12]犬细小病毒JS12株VP2基因的分子特征及其在大肠杆菌中的表达. 王永山,毕振威,夏兴霞,欧阳伟. 2013

[13]抗犬细小病毒免疫球蛋白临床应用研究. 李六金,屈红丽,姜焕宏,李成,吴钟灵,陈惠茹,李宏. 2003

[14]犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因序列分析. 唐井玉,李传峰,陈宗艳,孟春春,王权,刘光清. 2015

[15]犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因的序列分析. 唐井玉,李传峰,戚伟强,贾仿阔,陈宗艳. 2015

[16]猫泛白细胞减少症病毒XJI-05株的分离及鉴定. 苏洁,姜骞,李慕瑶,王静,刘家森,司昌德,刘倪虹,曲连东. 2008

[17]抗CPV-2a单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立. 王净,李刚,王鹏,曾妮,穆秀明,高志花,王慧文,史利军. 2011

[18]犬细小病毒VP2截短基因的原核表达及表达蛋白抗原性分析. 王净,王鹏,李刚,史利军,袁维峰,王慧文,穆秀明,高志花. 2012

[19]犬细小病毒新2b型分离株的分离鉴定. 王建科,刘辉哲,林鹏,赵航,程悦宁,张淼,郭利,朱洪伟,武华. 2016

[20]犬细小病毒兰州分离株VP2基因的克隆及进化树分析. 王俊,舒龙,郭慧琛,曹随忠,彭广能,孙世琪. 2012

作者其他论文 更多>>