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利用CRISPR/Cas9编辑草莓Fv PDS基因的研

文献类型： 中文期刊

作者： 刘丽锋;宋艳红;赵霞;李刚;周厚成

作者机构：

关键词： 草莓;CRISPR/Cas9;Fv PDS;基因编辑

期刊名称：园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase,PDS）是类胡萝卜素生物合成的关键酶，其编码的PDS基因参与并调控植物类胡萝卜素的累积，PDS基因突变会使植物产生肉眼可见的白化表型，常用来作为检测基因编辑成功与否的标记基因。选取森林草莓Fv PDS基因作为靶标，利用CRISPR/Cas9系统构建双靶点基因编辑载体，农杆菌介导法稳定遗传转化森林草莓种质HLJ-005（红果）、HLJ-004（白果），通过TA克隆测序法分析基因编辑的类型。遗传转化HLJ-005约2 250块叶片外植体，筛选到具有卡那霉素抗性的植株147株，通过PCR鉴定，24株为阳性材料，阳性率为16.32%，最后测序获得了5株具有编辑的材料，编辑效率为20.83%；遗传转化HLJ-004约2305块叶片外植体，获得具有卡那霉素抗性的植株234株，PCR检测为6株阳性材料，阳性率为2.56%，测序只有3株为具有编辑的材料，编辑效率为50%。两个编辑位点都产生了突变，分别是单碱基或多个碱基的缺失，但是这两份种质的突变类型不尽相同。结果表明，利用CRISPR/Cas9系统可以通过稳定表达，对HLJ-004、HLJ-005这两个森林草莓实现双靶点同时敲除，HLJ-004、HLJ-005可作为草莓基因编辑的遗传转化材料，并验证了适合草莓基因编辑的CRISPR/Cas9系统。

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