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实时荧光LAMP法快速检测转基因猪的外源基因hCD46

文献类型： 中文期刊

作者： 张真;李津;苗健;刘巍;李刚;李华斌;李春和;温丽娟;赵瑞利;范君文;赵忠鹏

作者机构：

关键词： 环介导等温扩增(LAMP);实时荧光;检测;快速;外源基因

期刊名称：中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了建立快速、简便、准确的检测转基因猪外源外源基因的方法。试验采用了实时荧光LAMP法的检测转基因猪的外源基因。针对hCD46基因设计6条特异性引物，在63℃条件下，检测时间在45 min以内完成核酸扩增。通过实时荧光监测仪监测LAMP扩增中SYBR Green I染料在紫外荧光下激发的荧光信号强度，作为hCD46基因扩增的判定依据。结果表明：构建的方法灵敏度高，最小可检测低至4.4×102个拷贝，建立的实时荧光LAMP法检测转基因猪的外源基因hCD46的灵敏度是常规PCR检测方法的100倍；并且特异性好，与转基因猪中的外源基因hCD39、hLEA29Y均无交叉反应；检测转基因猪的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及口腔拭子样本，检测结果显示样本中均可检测出转基因成分。说明该方法操作简单，反应快速，灵敏度高，特异性好，并且可以对猪活体进行无损伤采样检测，适合在现场快速简便的操作。

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