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猪捷申病毒8型rVP1-ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 胡峰;刘杉杉;蔺文成;王晓玲;张超范;王朝;刘朝霞;胡泉博;崔尚金

作者机构：

关键词： 猪捷申病毒;重组VP1蛋白;原核表达;间接ELISA

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2012 年 03 期

页码： 258-263

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性血清特异性识别。以纯化的重组蛋白包被ELISA反应板,建立了检测PTV抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果表明,重组VP1蛋白与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒阳性血清不发生反应。敏感性试验结果表明血清稀释至1∶800时仍检测为阳性。该方法的批内、批间变异系数均小于10%,表明具有较好的重复性。利用建立的方法对633份临床样品进行检测,阳性率是88.10%。选取58份临床样品与间接免疫荧光方法作比对试验,两者的符合率是94.80%。

分类号： S858.28

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