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鸡毒害艾美耳球虫LZ株MIC5基因的重组表达及其表达产物的抗原性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 刘红霞;贾万忠;郭爱疆;张少华;闫鸿斌;岳城;才学鹏

作者机构：

关键词： 毒害艾美耳球虫;微线蛋白5;基因克隆;重组表达;免疫原性

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2008 年 39 卷 11 期

页码： 1575-1580

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据已发表的鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)微线蛋白5(Microneme protein 5,MIC-5)基因的核苷酸序列设计引物,以毒害艾美耳球虫(E.necatrix)DNA为模板,利用PCR方法扩增出EnMIC-5部分基因片段。将基因片段与pMD18-T simple载体连接,重组质粒测序结果表明EnMIC-5基因大小为1 470 bp,编码490个氨基酸。EnMIC-5与pET-28a(+)载体构建重组表达质粒pET-EnMIC-5,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,表达产物为相对分子质量约57.5 ku的融合蛋白。Western-blot分析结果表明表达蛋白可被鸡感染E.necatrix阳性血清识别。用重组蛋白免疫昆明鼠,一免后15 d即可检测到相应抗体,且抗体在三免后40 d仍维持较高水平,证实重组蛋白具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生高滴度的特异性抗体。

分类号： S852.723

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