绵羊SRY基因的分子克隆及序列分析
文献类型: 中文期刊
作者: 葛宝生;许罕华;周鼎年;朱裕鼎;高军;刘冬梅;沈孝宙
作者机构:
关键词: 绵羊,SRY,PCR,分子克隆,DNA序列测定,同源性
期刊名称:中国兽医学报
ISSN:
年卷期: 1994 年 04 期
页码:
收录情况: 北大核心
摘要: 本研究利用常规方法提取绵羊基因组DNA,根据人的SRY基因核心序列设计合成了一对引物P1、P2。用PCR技术对公、母绵羊基因组DNA进行体外扩增,将所扩增出的公绵羊特异性SRY基因片段重组到质粒DNApUC19的SmaI部位并转化到E.coliDH10B中。挑选阳性克隆进行微溶分析,并用限制性内切酶EcoRI、HindⅢ酶解。鉴定结果表明,插入片段长度与PCR扩增带相符,约203bp。用Sanger的双脱氧末端终止法测定绵羊SRY基因核心序列的部分序列,结果表明,用PCR分离并重组到质粒载体中的绵羊SRY基因核心序列部分序列长度为203bp,这与设计完全相符。其中该序列的155个bp与人的SRY基因相应序列的同源性为82.58%(128/155)。可见哺乳动物SRY基因的核心序列具有高度保守性,种间差异很小。
分类号: S826.2
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