数字农科院2.0

猪II型圆环病毒全基因组序列分析及其ORF1和ORF2基因的克隆与表达

文献类型： 中文期刊

作者： 韩凌霞;陈艳;崔尚金;王云峰;仇华吉;童光志

作者机构：

关键词： PCV-2;原核表达;诊断抗原

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2004 年 26 卷 01 期

页码：

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪II型圆环病毒(PCV＿2)的2个主要开放阅读框ORF1和ORF2分别编码病毒的复制酶Rep和结构蛋白Cap。本试验将分离株L株病毒感染PK15细胞系,提取总DNA并以其为模板,通过PCR分别扩增了全病毒基因组、完整的Rep和Cap基因,并克隆到pMD18T载体中,进行了序列测定。将Rep和Cap基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pPROEXTMHT中,以融合蛋白的形式表达了这两种蛋白。根据文献报道,致病性的PCV＿2与无致病性的PCV1的型特异性抗原决定簇主要位于Cap基因的羧基端部分,本实验利用原核表达载体pGEX＿6p＿1融合表达了Cap基因羧基端423bp的片段。通过薄层扫描各重组菌诱导表达产物的SDS＿PAGE结果,重组质粒pPRO＿Cap和pPRO＿Rep以及pGEX＿ΔCap的外源基因表达量分别占总菌体总蛋白的15.1%、30.4%和19.6%。将表达的三种蛋白作为抗原,通过酶联免疫吸附试验分别与PCV＿2阳性猪血清和SPF猪血清进行了反应,pGEX＿ΔCap表达的蛋白(Cap蛋白的羧基端部分)抗原反应性最强,这表明截短的Cap蛋白羧基端部分将是一个良好的诊断PCV＿2感染用候选抗原。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]猪Ⅱ型圆环病毒全基因组序列分析及其ORF1和ORF2基因的克隆与表达. 韩凌霞,陈艳,崔尚金,王云峰,仇华吉,童光志. 2004

[2]布鲁氏菌SUMO-BCSP31重组表达菌的构建及免疫原性分析. 杨艳玲,郭利,王建科,孙娜,温永俊. 2013

[3]不同亚型流感病毒NP基因的原核表达研究. 刘大飞,杨涛,刘明,刘春国,何利昆,刘大程,桑学波. 2007

[4]H5亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆及表达. 黎玉梅,邓国华,冉多良,熊蕊,陈化兰. 2007

[5]Investigation on the co-infections of Toxoplasma gondii with PRRSV, CSFV or PCV-2 in swine in part of China. Wang Shuai,Zhang Meng,Liu Xin-chao,Lin Tao,Zhao Guang-wei,Ia Hassan,Yan Ruo-feng,Song Xiao-kai,Li Xiang-rui,Yang Han-chun,Lin Tao,Yuan Shi-shan. 2015

[6]猪圆环病毒2型结构蛋白Cap在果蝇S2细胞中稳定表达与鉴定的研究. 马凯凯,张琦,胡高维,常兴妮,杨建设,丁艳平,李志勇. 2017

[7]猪圆环病毒(PCV-2)的分离鉴定及初步分析. 崔尚金,李媛,李建伟,童光志,崔益洙. 2002

[8]PCV-2、PCV-3、PCV-4三重PCR鉴别检测方法的建立与应用. 王勤,欧云文,汪洋,潘琴,刘俐君,何博. 2022

[9]牛带绦虫8ku蛋白基因家族cDNA的克隆和序列分析. 王玉朝,贾万忠,闫鸿斌,郭爱疆,岳城. 2010

[10]水貂阿留申病基因工程诊断抗原的制备. 张蕾,柴秀丽,冯佩平,张海玲,胡博,白雪,赵建军,冯卓,王振军. 2015

[11]猪囊尾蚴磷蛋白在毕赤酵母中的表达及初步应用. 苏彩霞,才学鹏,韩雪清,骆学农,郑亚东,窦永喜. 2003

[12]细粒棘球绦虫抗原B的研究进展. 袁维峰,巫剑,贾红,侯绍华,郭晓宇,马世春,朱鸿飞. 2013

[13]伊氏锥虫ShTat12VSG的重组表达及其在诊断上的潜力. 熊丽,周勇志,王欣之,张厚双,周金林. 2009

[14]邓氏巴贝斯虫血清学诊断抗原的筛选. 年月丽,王锦明,张尚弟,张卫军,关贵全,殷宏,尤崇革. 2024

[15]单核细胞增生李斯特菌新型内化素lmo0549的分子特征及其表达. 王立霞,孟庆玲,乔军,郭晶,伍晔晖,才学鹏,蔡扩军,王登峰. 2019

[16]小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 周岩岩,李玲霞,吴锦艳,余树芳,李娇阳,刘丹,冯倩,孙晶晶,何苗,魏凡华,尚佑军. 2019

[17]棉花转甲基酶基因GhBSMT1的克隆、原核表达及表达谱分析. 井维霞,黄欣蒸,刘丹凤,张强,寇俊凤,曲爱军,张永军,郭予元. 2017

[18]蛋白激发子Hrip1互作蛋白的筛选及其原核表达. 李书鹏,杨秀芬,袁京京,邱德文. 2017

[19]二化螟APN1的原核表达及其与Cry2Aa蛋白的结合特性研究. 刘慧,李博,牛林,邱林,王永. 2018

[20]家蚕微孢子虫己糖激酶基因的克隆及序列结构分析和原核表达. 陈红丽,彭祥然,李孝良,Bismark Kyei,尚瑞沙,齐静茹,张轶岭,徐莉,沈中元. 2018

作者其他论文 更多>>