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PRV TK蛋白单克隆抗体的制备及ELISA抗体检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 孙依慧;李磊;王东丽;董一凡;周艳君;单同领;高飞;郑浩;姜一峰;于海;李丽薇;童光志;徐彦召;童武

作者机构：

关键词： 伪狂犬病病毒;原核表达;TK蛋白;单克隆抗体

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了制备伪狂犬病毒TK蛋白的特异性单克隆抗体，本研究将TK基因克隆到原核表达载体中，构建了重组的pColdI-TK质粒。将重组质粒pColdI-TK转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中，经诱导和纯化，获得TK蛋白。将TK蛋白3次免疫小鼠，选取血清效价最高的小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合，经过间接ELISA筛选和3次亚克隆获得一株阳性的杂交瘤细胞，命名为7E10。经鉴定，抗体亚型鉴定结果为Ig G1和Kappa，制备的腹水抗体中和效价高达1︰51 200，Western blot和间接免疫荧光试验结果表明单克隆抗体具有很好的特异性。为PRV流行毒株TK蛋白结构与功能研究和后续建立PRV特异性诊断方法及相关研究提供了重要工具。

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