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鸭源呼肠孤病毒Sigma A蛋白的原核表达及免疫活性检测

文献类型： 中文期刊

作者： 朱英奇;陈宗艳;李传峰;孟春春;王桂军;刘光清

作者机构：

关键词： 鸭源呼肠孤病毒;Sigma A基因;原核表达;免疫原

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2013 年 35 卷 10 期

页码： 849-851

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备新型鸭源呼肠孤病毒(DRV)TH11株Sigma A蛋白的多克隆抗体,本研究采用RT-PCR方法扩增DRV TH11株Sigma A的编码基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。采用SDS-PAGE和western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,Sigma A基因不仅可以在大肠杆菌中高水平表达,表达产物的分子量约66 ku,而且表达产物能够被特异性DRV多克隆抗体识别,证明表达的Sigma A蛋白具有良好的免疫活性。以纯化的Sigma A蛋白免疫实验兔制备抗Sigma A蛋白的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示其效价达1∶20 000以上。间接免疫荧光试验表明,多克隆抗体能够特异性识别DRV的Sigma A蛋白,表明Sigma A蛋白具有良好的免疫原性。本研究为进一步研究Sigma A蛋白的功能,以及建立DRV检测方法奠定了基础。

分类号： S852.65

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