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鸭病毒性肝炎病毒RNA聚合酶在真核细胞中的表达及亚细胞定位

文献类型： 中文期刊

作者： 王超;李传峰;陈宗艳;付玉志;吴润;刘光清

作者机构：

关键词： 鸭病毒性肝炎病毒;RNA依赖性RNA聚合酶;亚细胞定位

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2012 年 01 期

页码： 35-38

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究鸭病毒性肝炎病毒RNA依赖性RNA聚合酶的分子生物学特性及其在细胞中的定位,构建了RNA依赖性RNA聚合酶与增强型绿色荧光蛋白融合表达的真核重组表达质粒;然后用脂质体介导转染MDCK细胞。分别使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜以及4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和蛋白免疫电泳试验等方法检测了RNA依赖性RNA聚合酶在细胞中的表达和亚细胞定位情况。结果表明,RNA依赖性RNA聚合酶能与增强型绿色荧光蛋白一起在MDCK细胞中良好表达,且主要分布于细胞核中,Western-blot分析结果显示,融合蛋白在80ku处出现阳性条带,说明表达的外源蛋白具有免疫活性。表明成功构建了RNA依赖性RNA聚合酶与增强型绿色荧光蛋白融合表达载体,并在真核细胞内实现了表达,通过检测荧光蛋白,发现RNA依赖性RNA聚合酶主要在细胞核中发挥复制酶的功能。

分类号： S852.65

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