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黑曲霉H1的cDNA文库构建及其溶磷相关基因的筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 唐超西;龚明波;李顺鹏;朱昌雄

作者机构：

关键词： 黑曲霉;cDNA文库;基因psgA;有机酸

期刊名称：微生物学报

ISSN：

年卷期： 2012 年 03 期

页码： 311-317

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】构建溶磷黑曲霉H1的cDNA文库,并从中筛选溶磷相关基因。【方法】利用SMART技术合成黑曲霉H1的双链cDNA并将其连接于pBluescriptIISK(+)载体上,将重组质粒转化E.coliHST08,得到黑曲霉的初级cDNA文库。利用难溶磷培养基筛选具有溶磷能力的克隆子,测序并利用Blast分析基因序列。在难溶磷液体培养基中,进行克隆子对溶液pH值、可溶磷含量的影响和产有机酸实验。【结果】成功构建了黑曲霉H1的cDNA文库,其初级库容量约为5.65×106cfu/mL,重组率约为99.15%;通过难溶磷固体培养基筛选,得到具有溶磷圈的克隆子61个,其中克隆子H-54的cDN...

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