大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建
文献类型: 中文期刊
作者: 于海鹏;潘钰;蒙明明;李海英
作者机构:
关键词: 土著大豆根瘤菌;大豆血红蛋白基因lba DNA重组技术;工程菌株;三亲本杂交
期刊名称:生物技术通报
ISSN: 1002-5464
年卷期: 2012 年 28 卷 02 期
页码: 69-74
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列。利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba。采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)和SFH(pTR102)。盆栽试验发现,接种SFH(pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH(pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标。试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果。
分类号: S144.3
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