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口蹄疫病毒NSP3ABC基因在昆虫细胞中的分泌表达及其活性检测

文献类型： 中文期刊

作者： 马江涛;卢曾军;曹轶梅;郭慧琛;郭建宏;祝秀梅;杨孝朴;刘在新

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;3ABC基因;杆状病毒;分泌性表达

期刊名称：生物工程学报

ISSN：

年卷期： 2007 年 03 期

页码： 540-545

收录情况： CSCD

摘要： 用设计的特异引物,扩增得到了N-端带有6×His编码序列的口蹄疫病毒完整3ABC基因序列,并将其亚克隆入带有蜂毒溶血肽序列的穿梭质粒pMelBac-B中,构建了重组质粒pMel-3ABC。将该重组质粒与杆状病毒骨架DNABac-N-BlueTM共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒。重组病毒感染Sf9昆虫细胞,采用通过SDS-PAGE和Westernblot检测,证明目的基因在昆虫细胞中得到了正确的表达,表达产物分泌至细胞培养上清中,并具有良好的生物活性。表达的目的蛋白经过镍柱亲和层析法纯化后,用间接ELISA方法检测与口蹄疫病毒感染动物血清的反应性...

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