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蜂房哈夫尼菌植酸酶基因appA的克隆、表达及酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

作者: 谷维娜;黄火清;杨培龙;罗会颖;孟昆;王亚茹;姚斌

作者机构:

关键词: 植酸酶;基因表达;纯化;酶学性质

期刊名称:生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2007 年 23 卷 06 期

页码: 1017-1021

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从蜂房哈夫尼菌(Hafniaalvei)中克隆获得一个植酸酶编码基因appA,该基因全长1335bp,编码444个氨基酸,其中前33个氨基酸为信号肽,成熟蛋白的理论分子量为45.2kD。将基因appA克隆到大肠杆菌E.coli表达载体pET-22b(+),并在大肠杆菌中表达,表达产物具有植酸酶活性。对表达的酶蛋白进行纯化,并初步研究了该酶的酶学性质,结果表明:酶的作用最适pH值为4.5;在pH2.0~10.0范围内,酶活性保留80%以上;酶的作用最适温度为60℃;酶的比活性为356.7U/mg,酶动力学分析表明其Km为0.49mmol/L,Vmax为238U/mg;该酶对胰蛋白酶和胃蛋白酶有一定的抗性。该研究为哈夫尼菌属来源植酸酶的首次报道。

分类号: Q78

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