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田鼠巴贝西虫截短型分泌抗原1的原核表达与抗原性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 姬艺洪;刘静娴;史智扬;宋小凯;李祥瑞;周金林;焦永军

作者机构：

关键词： 田鼠巴贝西虫;分泌抗原;纯化;质谱分析;抗原性鉴定

期刊名称：江苏预防医学

ISSN： 1006-9070

年卷期： 2017 年 2 期

页码： 124-127

摘要： 目的对田鼠巴贝西虫(Babesia microti)的诊断抗原分泌抗原1(Babesia microtisecreted antigen 1,BmSA1)的截短部分(tBmSA1)进行克隆构建、原核表达与纯化,并对重组tBmSA1进行质谱鉴定以及抗原性鉴定。方法通过PCR扩增截短型tBmSA1基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组tBmSA1,使用AKTA进行镍亲和层析纯化,并对纯化的重组tBmSA1进行质谱分析,通过Western Blot和ELISA鉴定重组tBmSA1的抗原性。结果成功构建了重组质粒pET-30a(+)-tBmSA1,重组tBmSA1得到高效表达和纯化,质谱分析验证了其正确性,Western Blot和ELISA结果显示其具有较好的抗原性。结论实现了田鼠巴贝西虫tBmSA1的原核高效表达,并验证了其诊断价值,为田鼠巴贝西虫感染诊断奠定了基础。

分类号： R392

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