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多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 杨洋;李文卉;张念章;李婷婷;李立;闫鸿斌;贾万忠;付宝权

作者机构：

关键词： 多头带绦虫;TmPKA-C;原核表达;反应原性

期刊名称：中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2017 年 45 卷 10 期

页码： 2858-2864

摘要： 为鉴定多头带绦虫蛋白激酶A催化亚基(Tm PKA-C)基因作为诊断抗原的潜能,本试验以多头带绦虫成虫RNA为模板,利用RT-PCR扩增Tm PKA-C基因。将Tm PKA-C基因片段连接至p ET-30a原核表达载体进行原核表达,然后利用Western blotting和间接ELISA分析该蛋白的反应原性。结果表明,Tm PKA-C基因开放阅读框的长度为1 032 bp,可编码343个氨基酸。Tm PKA-C基因的表达产物主要以包涵体的形式存在,重组蛋白的分子质量大小约42 ku。Western blotting结果表明,该重组蛋白既能与自然感染脑多头蚴的绵羊血清发生特异性反应,又能与人工感染脑多头蚴不同时间段的绵羊血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性。间接ELISA分析结果表明,脑多头蚴绵羊血清能与重组蛋白发生特异性反应,进一步证明该重组蛋白的反应原性良好。本研究为筛选脑多头蚴病诊断新抗原奠定了基础。

分类号： S852.734

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