禽源H9N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 刘晓敏;汪琪;杨海明;宫晓倩;阮宝阳;张鹏;单同领;童武;童光志;于海
作者机构:
关键词: 猪流感病毒;H9N2;RT-PCR;病毒拯救;反向遗传操作平台
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2017 年 25 卷 2 期
页码: 29-34
收录情况: 北大核心(2020版) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 利用RT-PCR技术扩增了禽源H9N2亚型猪流感病毒A/Swine/Guangxi/7/2007(H9N2)的8个目的基因片段,分别克隆至pBD双向转录表达载体。将8个重组质粒纯化后共转染293T细胞,54 h后收集上清,接种MDCK细胞。当拯救的病毒在MDCK细胞上增殖至第3代时,收集的细胞上清经检测具有血凝效价。经过测序分析,确定获救病毒的8个基因片段序列与野生株完全一致,表明病毒拯救成功。禽源H9N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的成功建立为探索猪流感病毒致病机理、传播机制与基因功能研究奠定了基础。
分类号: S852.659.5
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