三源重组H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 汪琪;刘晓敏;杨海明;王帅勇;单同领;童武;李国新;童光志;于海
作者机构:
关键词: 猪流感病毒;H1N1;反向遗传操作技术;病毒拯救
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2017 年 3 期
页码: 28-33
收录情况: 北大核心(2020版) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 利用RT-PCR技术扩增三源重组H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/Tianjin/10/2013(H1N1)的8个基因片段,分别克隆至双向转录/表达载体p BD上。将8个重组质粒纯化后共转染293T细胞,收取转染48 h后的细胞上清并接种MDCK细胞,成功拯救出有血凝活性的病毒。全基因序列测定结果表明,拯救病毒与野生病毒的核苷酸序列完全一致。生长曲线的测定结果表明,不同时间点野生毒株与拯救毒株在MDCK细胞上的病毒滴度没有明显差异。三源重组H1N1亚型猪流感病毒反向遗传操作平台的成功建立为进一步开展猪流感病毒的生物学特性研究奠定了基础,同时也为H1N1亚型猪流感疫苗的研制开辟了新的途径。
分类号: S852.651
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