快速提取肉类基因组DNA的裂解液的研究
文献类型: 中文期刊
作者: 李婷婷;张桂兰;王之莹;陈爱亮
作者机构:
关键词: 重组酶聚合酶扩增技术;现场检测;肉类;裂解液;基因组DNA
期刊名称:食品安全质量检测学报
ISSN: 2095-0381
年卷期: 2018 年 17 期
页码: 4755-4758
收录情况: 北大核心(2020版) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 目的配制一种快速提取肉类DNA且满足重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)要求的裂解液。方法分别配制3种裂解液:Na OH裂解液、Chelex裂解液与PBS裂解液,取200μL裂解液与20 mg肉类样品进行混合,振荡5 s,取上清液稀释10倍直接作为扩增模板。结果 3种裂解液中Na OH裂解液提取DNA在稀释与未稀释条件下均有较好的扩增,Chelex裂解液提取DNA在稀释与未稀释下均无扩增,PBS裂解液提取DNA在稀释作用下有较好的扩增,在未稀释作用下无扩增。裂解液提取法和试剂盒方法提取的纯度、产物的大小几乎一致,所扩增的为同一产物,裂解液所需成本与试剂盒方法相比较低。结论 Na OH裂解液可以在5 min内提取肉类中的DNA,浓度与纯度均较高,所需时间短,成本低,且满足分子检测要求。
分类号: TS251.1
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