数字农科院2.0

小反刍兽疫病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李林杰;刘萍;马鹏;王悦萦;郭富城;马晓霞;周建华;柏家林

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒(PPRV);SYBR Green Ⅰ;实时荧光定量PCR

期刊名称：华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2018 年 A1 期

页码： 84-88

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为了建立一种快速检测小反刍兽疫病毒的方法。根据Gen Bank中公布的PPRV Nigeria75/1株H基因序列设计2对引物,PCR扩增出1 830 bpH基因,构建标准质粒p MD-18-H。以标准质粒优化反应条件,建立了小反刍兽疫病毒H基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法。最优反应体系25μL:2×SYBR qPCR Mix 12. 5μL,模板DNA 1μL,特异引物各0. 2μL(0. 2μmol/L),DEPC H2O 10. 5μL;最佳反应条件:94℃2 min; 94℃5 s,57℃30 s,40个循环,Ct值与标准质粒模板浓度在3. 28×104～3. 28×10-2copies/μL 7个浓度梯度呈良好线性关系y=-2. 913x+36. 904,斜率为-2. 913,扩增效率120. 5%,相关系数R2=0. 994。建立的实时荧光定量PCR检测方法比普通PCR灵敏度高10 000倍,稳定性好,特异性强,对PPRV的准确诊断和定量检测具有重要意义。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]猪轮状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 陈小金,陈建飞,时洪艳,张志榜,冯力. 2010

[2]猪血清淀粉样蛋白3分子SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用. 郇贝丽,刘珂,马改妮,魏建超,邵东华,李蓓蓓,邱亚峰,石元元,马志永. 2017

[3]牛疱疹病毒4型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 程悦宁,王振军,曹泽昭,王春霞,吴丹妮,李响,张海丽,闫曼平,张竞,关继羽. 2025

[4]小反刍兽疫病毒甘肃株F基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备. 肖敏,包世俊,邢小勇,常惠芸,薛慧文. 2017

[5]羊源GADD45A基因过表达Vero细胞系的构建及其对PPRV复制的影响. 丁海燕,袁莉刚,赵竟涵,郑海学,尚佑军,李丹. 2025

[6]ATG16基因缺陷Vero细胞系的建立及其抗小反刍兽疫病毒功能分析. 赵庆露,陈红梅,韦定呈,朱学亮,王炫杰,胡占颖,李瑞哲,张瑞. 2026

[7]Real-time RT-PCR检测J亚群禽白血病病毒的研究. 张在平,田进,孟庆文,马学恩. 2010

[8]SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测埃博拉病毒方法的建立. 刘阳,史子学,马玉堃,王皓婷,王宗尧. 2012

[9]基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立. 孟春春,段云兵,仇旭升,金仕强,詹媛,张向乐,于圣青,丁铲. 2011

[10]检测猫杯状病毒RT-qPCR方法的优化与应用. 刘迪,郑亚婷,许鑫燕,董丽丽,康洪涛,姜骞,杨鸣发,刘家森,曲连东. 2022

[11]不同pH值条件下培养旋毛虫TsGLS mRNA的表达变化. 赵祥,于洁,胡静,许静秀,韩彩霞,李晓云,宋铭忻. 2018

[12]热胁迫下糙皮侧耳实时荧光定量PCR内参基因的选择. 侯志浩,赵梦然,陈强,张妍,黄晨阳,邬向丽. 2019

[13]家蚕核型多角体病毒极早期蛋白PE38与家蚕SRSF蛋白激酶的相互作用关系验证. 于洁,陈红丽,张志林,徐莉,沈中元,唐旭东. 2017

[14]水稻对穗枯病的抗病机理初步研究. 李路,徐以华,梁梦琦,王玲,刘连盟,侯雨萱,黎起秦,黄世文. 2017

[15]不同土壤玉米根际挥发性有机物组成和微生物群落特征. 李艳玲,宋阿琳,卢玉秋,王恩召,唐治喜,刘雄舵,范分良. 2019

[16]NaCl和Na_2CO_3对不同棉花基因组的DNA甲基化影响. 王德龙,阴祖军,王俊娟,樊伟丽,王帅,赵小洁,张天豹,叶武威. 2014

[17]芽孢杆菌B006及其surfactin突变株对黄瓜枯萎病的抑制作用. 郭荣君,李世东. 2013

[18]如皋鸡不同时期肌肉组织生长相关基因的表达谱分析. 常国斌,盛中伟,黄正洋,周伟,龚琳琳,陈丹艳,刘岩,王克华,窦套存,陈国宏. 2012

[19]实时荧光定量PCR在植物害虫研究中的应用. 王忠跃,孔繁芳,武艳霞. 2011

[20]PRNP基因SYBRGreenⅠ双标准曲线法荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用. 艾文娜,吴润,刁小龙. 2013

作者其他论文 更多>>