文献类型： 中文期刊
作者： 谢永兴;夏德利;黄立平;危艳武;吴洪丽;朱红振;冯力;刘长明
作者机构：
关键词： 猪圆环病毒2型;Cap蛋白;猪细小病毒1型;VP2蛋白;重组伪狂犬病病毒;重组质粒;免疫原性
期刊名称：黑龙江畜牧兽医
ISSN： 1004-7034
年卷期： 2019 年 5 期
页码： 10-15,22
收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版）
摘要： 为了构建表达猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白和猪细小病毒1型(PPV-1)VP2蛋白的重组伪狂犬病病毒(PRV)及鉴定其免疫原性,试验采用经典同源重组技术构建重组病毒,利用密码子优化的VP2基因(VP2opti)和含PRV gG蛋白信号肽序列的VP2opti基因分别构建重组质粒pMD18T-LR(TK)-VP2opti和pMD18T-LR(TK)-VP2opti(SP).用已构建的重组病毒rPRV-TK-/gE-/gG-/3Cap+为骨架,以EGFP为标签经同源重组获得重组病毒.采用IPMA法鉴定Cap蛋白和VP2蛋白抗原在重组病毒感染的PK-15细胞中的表达,采用IFA法鉴定VP2蛋白在重组病毒感染的PK-15细胞中的表达与定位.用这2株重组病毒免疫小鼠,通过检测血清中PRV、PCV-2和PPV-1抗体水平对构建的重组病毒在小鼠体内的免疫原性进行评价.结果表明:经同源重组获得重组病毒rPRV-TK-/VP2+/gE-/gG-/2Cap+和rPRV-TK-/VP2+(SP)/gE-/gG-/2Cap+;在重组病毒感染的PK-15细胞中均能检测到阳性Cap蛋白和VP2蛋白抗原;重组病毒rPRV-TK-/VP2+/gE-/gG-/2Cap+表达的VP2蛋白定位于细胞浆和细胞核,而重组病毒rPRV-TK-/VP2+(SP)/gE-/gG-/2Cap+表达的VP2蛋白定位于细胞浆;用这2株重组病毒免疫小鼠能够检测到PRV中和抗体;用灭活的重组病毒免疫小鼠后可产生低水平的Cap和VP2抗体,而重组病毒活毒免疫的小鼠未检测到相应抗体.说明这2株重组病毒在体外能够表达Cap蛋白和VP2蛋白,PRV gG蛋白信号肽序列的加入促进了VP2蛋白从细胞核的释放.
分类号： S852.651
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