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鸡源AID基因的克隆及其抗新城疫病毒作用

文献类型: 中文期刊

作者: 徐腾飞;张耀丹;李继红;汪伟;孟春春;孙英杰;谭磊;宋翠萍;廖瑛;丁铲;仇旭升;刁有祥

作者机构:

关键词: 活化诱导胞嘧啶脱氨酶;新城疫病毒;基因编辑酶;抗病毒作用

期刊名称:中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2019 年 5 期

页码: 975-981

收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)

摘要: APOBEC家族成员中AID蛋白具有DNA/RNA编辑酶功能,同时具有抑制病毒增殖的作用,但具体机制尚不明了.本研究首先根据NCBI公布的鸡全基因组序列进行生物信息学分析,预测鸡AID的基因序列并通过设计PCR引物,成功在鸡法氏囊cDNA样品中扩增出鸡AID基因(chAID).通过建立并优化chAID的实时定量RT-PCR(rRT-PCR)检测方法,对鸡体内AID基因的表达以及其分布情况进行检测;同时通过Western blot试验对chAID蛋白在鸡细胞中的表达进行检测.试验显示,chAID基因能够在鸡细胞以及组织脏器中正常表达.新城疫病毒(NDV)感染鸡原代成纤维细胞、淋巴细胞后能够引起内源性chAID基因水平的上调;SPF鸡感染NDV后,chAID基因在不同组织脏器中均出现上调现象,以免疫器官最为显著.为了进一步验证chAID基因对NDV增殖的影响,进一步检测在细胞中过表达chAID基因对NDV增殖的影响.研究结果表明:重组chAID蛋白具有抗NDV病毒活性,本研究为进一步研究鸡chAID奠定了基础.

分类号: S858.31

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