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抗猫细小病毒嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 薛雨佳;宋彩玲;赵爽爽;李彤彤;王文静;张云;刘明

作者机构：

关键词： 基因工程嵌合抗体;猫细小病毒;昆虫杆状病毒表达系统

期刊名称：中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2019 年 6 期

页码： 632-636

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为降低单克隆抗体(MAb)在犬体内的免疫原性,本研究克隆了具有中和猫、犬细小病毒(FPV、CPV)活性的MAb (3EB)的轻、重链可变区基因及犬天然抗体(NAb)轻、重链恒定区基因,通过融合PCR获得鼠-犬嵌合抗体基因.构建能够表达嵌合抗体的重组质粒,经昆虫杆状病毒表达系统对重组嵌合抗体进行表达.SDS-PAGE和western blot试验显示鼠-犬嵌合抗体重链为55 ku、轻链为25 ku.间接免疫荧光试验显示该嵌合抗体能够与抗犬IgG和FPV特异性结合.上述结果表明,嵌合抗体保留了原MAb 3EB对病毒特异结合能力的基础上,将鼠源恒定区替换为犬源NAb的恒定区.病毒中和试验表明嵌合抗体保留了3EB对FPV、CPV的中和活性.本研究首次通过昆虫杆状病毒表达系统表达了抗FPV、CPV的嵌合抗体,降低了原MAb的免疫原性,对FPV、CPV病临床治疗用抗体药物的研制具有重要指导意义.

分类号： S852.4

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