数字农科院2.0

鸭疫里默氏杆菌Tet(X)基因原核表达及其功能鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 黄雪龙;单敏;陈烨;刘玲俐;何晶;王小兰;于圣青;罗廷荣;涂剑;李涛

作者机构：

关键词： 鸭疫里默氏杆菌;Tet(X)基因;原核表达;功能鉴定

期刊名称：南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2019 年 50 卷 4 期

页码： 844-850

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： [目的]确定鸭疫里默氏杆菌Tet(X)基因是否与四环素类耐药相关,寻找出抗鸭疫里默氏杆菌药物研发新靶点.[方法]克隆鸭疫里默氏杆菌Tet(X)基因,以大肠杆菌原核表达体系进行诱导表达,利用生物信息学软件分析原核表达蛋白的功能和特性,并采用实时荧光定量PCR检测四环素和多西环素对鸭疫里默氏杆菌Tet(X)基因的调控作用.[结果]从鸭疫里默氏杆菌基因组扩增获得的Tet(X)基因编码框全长1167 bp,编码388个氨基酸,其编码蛋白分子量约42.53 kD,理论等电点(pI)为10.073,与AS87_09615(Yb2)、RIA_0369(YA-GD)、RAYM_08235(RA-YM)、G148_1777(RA-CH-2)、RIA_0365(YA-GD)、G148-1767(RA-CH-2)、B739_0035(RA-CH-1)和B739_0030(RA-CH-1)等8个来源于不同种鸭疫里默氏杆菌的蛋白具有较高同源性(96%~100%).利用原核表达体系诱导表达获得的Tet(X)融合蛋白分子量约45.40 kD,且主要以包涵体的形式表达.Tet(X)融合蛋白能有效提高宿主菌株对典型四环素类药物(四环素和多西环素)的最小抑菌浓度(MIC);实时荧光定量PCR检测结果显示,四环素和多西环素对鸭疫里默氏杆菌Tet(X)基因表达量的调控呈非线性.四环素浓度为0~4 mg/L时,Tet(X)基因相对表达量随药物浓度的增加而逐渐增加;浓度为4~12 mg/L时,Tet(X)基因相对表达量随药物浓度的增加而逐渐降低.多西环素药物浓度为0~3 mg/L时,Tet(X)基因相对表达量随药物浓度的增加而逐渐增加;浓度为3~6 mg/L时,Tet(X)基因相对表达量随药物浓度的增加而逐渐降低.[结论]Tet(X)可有效提高宿主菌株对四环素类药物的耐受性,在一定的四环素类药物剂量范围内可诱导Tet(X)基因表达.不同鸭疫里默氏杆菌Tet(X)基因具有不同来源,说明Tet(X)可能存在基因水平转移,且具有环境扩散的风险.

分类号： S858.32

  • 相关文献

[1]鸭疫里默氏杆菌血凝素基因的克隆、表达及其蛋白的定位分析. 屠晶,胡青海,于圣青,丁铲,韩先干,朱寅玉,王小兰,苗双,卢凤英. 2012

[2]鸭疫里默氏杆菌假定溶血素相关蛋白基因Riean_0620的原核表达及溶血活性检测. 陶敏捷,姜盼,孙冰清,丁云竹,薛亚飞,曹立松,刘光清,胡青海. 2017

[3]鸭疫里默氏杆菌AS87-01740基因生物信息学分析及其原核表达. 单敏,李涛,何晶,李文海,王小兰,罗廷荣,于圣青. 2017

[4]鸭疫里默氏杆菌假定溶血素相关蛋白基因Riean_0415的原核表达及溶血活性检测. 姜盼,孙冰清,崔俊生,陶敏捷,丁云竹,薛亚飞,刘光清,胡青海. 2016

[5]鸭疫里默氏杆菌Ⅸ型分泌系统分泌蛋白AS87＿RS03090的原核表达及其突变株构建. 沈如玉,陈宗超,朱敏,牛朋飞,高崧,于圣青. 2022

[6]蚕蛹资源的开发利用研究. 桂仲争. 2017

[7]基于新一代测序技术的昆虫转录组学研究进展. 张棋麟,袁明龙. 2013

[8]水稻白叶枯病菌EAL结构域蛋白VieAxoo基因缺失突变和功能分析. 杨凤环,管文静,吴茂森,陈华民,田芳,许艳丽,何晨阳. 2011

[9]一个棉花生殖器官优势表达基因的启动子功能分析. 任茂智,陈全家,李丽,张锐,郭三堆. 2005

[10]大豆叶绿体多顺反子单交换表达载体的构建. 常玲,张江,陈俊,张银波,马立新. 2005

[11]对丝腺细胞因子SGF-1具有调控作用的家蚕miRNAs功能研究. 王欣,陈晨,范洋洋,谢雨辰,钱平,唐顺明,沈兴家. 2016

[12]农杆菌介导OsDREB基因转化库拉索芦荟(Aloe vera L.)的研究. 赵华,何聪芬,张佳星,刘蕾,钟秦. 2008

[13]油菜对菌核病抗性反应分子网络解析. 刘胜毅. 2010

[14]镰形扇头蜱serpin分子的克隆表达和功能鉴定. 俞英昉,狄青,周勇志,曹杰,张厚双,周金林. 2011

[15]吉氏巴贝西原虫TRAP分子的功能鉴定. 周金林,周勇志,张厚双,曹杰,王欣之. 2009

[16]一个棉花生殖器官优势表达基因的启动子功能分析. 任茂智,陈全家,李丽,张锐,郭三堆. 2005

[17]昆虫对CO2感受机制的研究进展. 陈秋燕,刘杨,王桂荣. 2022

[18]水稻白叶枯病菌HD-GYP结构域蛋白PXO_03945的功能鉴定. 钱珊珊,杨凤环,田芳,陈华民,何晨阳. 2017

[19]桃冷处理响应基因PdCIbHLH的克隆和功能鉴定. 王孝娣,冀晓昊,郑晓翠,王莹莹,宋杨,刘凤之. 2019

[20]越橘VcNAC072克隆及其促进花青素积累的功能分析. 宋杨,刘红弟,王海波,张红军,刘凤之. 2019

作者其他论文 更多>>