数字农科院2.0

棉铃虫中肠特异性结合蛋白ABCC1对Cry1Ac毒力的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 陈琳;魏纪珍;刘臣;牛琳琳;张彩虹;梁革梅

作者机构：

关键词： 棉铃虫;ABCC1;苏云金芽孢杆菌;Cry1Ac;结合蛋白;毒力

期刊名称：中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2019 年 19 期

页码： 3337-3345

摘要： [目的]研究棉铃虫(Helicoverpa armigera)中肠蛋白ABCC1(HaABCC1)与Cry1Ac的结合特性及对Cry1Ac毒力的影响,明确HaABCC1在Cry1Ac杀虫机制中的作用.[方法]分析HaABCC1基因序列,设计引物,通过原核表达得到HaABCC1两个跨膜区片段的蛋白,与Cry1Ac进行Ligand blot试验,验证其与Cry1Ac的体外结合特性;利用RNAi技术干扰棉铃虫幼虫的HaABCC1,在3龄幼虫腹部注射siABCC1,比较HaABCC1的表达量及Cry1Ac处理后棉铃虫死亡率的变化;通过细胞转染将ABCC1导入Sf9细胞系中,确定pAc-ABCC1重组质粒转入Sf9细胞后,用细胞生物测定的方法比较Cry1Ac处理后细胞死亡率的变化;比较敏感品系(96S)和Cry1Ac抗性品系(BtR)棉铃虫的HaABCC1基因全长序列,并通过荧光定量RT-PCR检测HaABCC1在抗、感棉铃虫中的表达量.[结果]HaABCC1跨膜区TMD1和TMD2在Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中成功表达,两个HaABCC1跨膜区片段蛋白均能与活化的Cry1Ac在体外结合;棉铃虫注射siABCC1后,HaABCC1的表达量显著下降,与未注射的棉铃虫、注射DEPC水和siEGFP的棉铃虫相比,用活化的Cry1Ac蛋白处理HaABCC1被干扰的棉铃虫,其幼虫死亡率显著降低,表明棉铃虫幼虫的HaABCC1被干扰后,能显著降低Cry1Ac对棉铃虫的毒力;用活化的Cry1Ac蛋白处理成功转入HaABCC1的Sf9细胞,与对照Sf9细胞相比,细胞的死亡率明显上升,表明将HaABCC1导入Sf9后能显著提高Cry1Ac处理后的细胞死亡率;抗性品系(BtR)与敏感品系(96S)棉铃虫的HaABCC1氨基酸序列没有差别,但抗性品系BtR棉铃虫HaABCC1的表达量显著降低.[结论]HaABCC1是Cry1Ac的特异性结合蛋白,可能是Cry1Ac的功能受体蛋白,并可能参与对Cry1Ac的抗性机制.

分类号： S433.4

  • 相关文献

[1]亚洲玉米螟中肠Cry1Ac毒素结合蛋白V-ATP酶A亚基的研究. 李宁,王振营,何康来. 2015

[2]Cry1Fa对Cry1Ac抗性棉铃虫的毒力评价. 郭予元,高希武,张涛,梁革梅. 2012

[3]ISO-DALT和IPG-DALT系统分离棉铃虫Cry1Ac结合蛋白比较. 梁革梅,陆琼,张杰,吴孔明,郭予元. 2009

[4]棉铃虫ABC转运蛋白ABCG1的基因克隆、亚细胞定位及其与Cry1Ac毒力的关系. 公玲玲,张丹丹,郑曰英,于佃平,肖玉涛,曲爱军. 2017

[5]田间棉铃虫种群对Cry1Ac蛋白的抗性基因频率. 李国平,高丽娜,黄建荣,姬婷婕,黄博,田彩红,陆宴辉,封洪强. 2018

[6]Vip3Aa及Cry1Ac对棉铃虫幼虫多种酶活力的影响. 梁革梅,高珍. 2012

[7]棉铃虫幼虫取食Vip3Aa蛋白后的中肠组织病理变化. 梁革梅,张丽丽,魏纪珍. 2012

[8]棉铃虫中肠钙粘蛋白、氨肽酶N及碱性磷酸酯酶的抗血清对Cry1Ac和Cry2Aa毒力的影响. 袁向东,赵曼,刘臣,陈琳,梁革梅. 2016

[9]Cry1Ac抗性棉铃虫对Cry2Ab的交互抗性研究. 吴孔明,田岩,梁革梅,张永军,郭予元. 2006

[10]棉铃虫田间种群对Bt毒素Cry1Ac主效抗性基因频率的分析. 高玉林,雷朝亮,吴孔明. 2013

[11]棉铃虫对Cry1Ac抗性的稳定性及其对适合度的影响. 李艳梅,张彦,魏纪珍,梁革梅,郭予元. 2012

[12]黄河流域棉区棉铃虫种群对Bt棉花的耐受性发展动态. 吴孔明,郭予元. 2006

[13]取食Cry2Ab蛋白后棉铃虫幼虫中肠组织的病理变化. 梁革梅,魏纪珍,张丽丽. 2013

[14]N-乙酰半乳糖胺对cry1Ac结合棉铃虫中肠氨肽酶的调控作用研究. 吴孔明,梁革梅,张永军,郭予元. 2006

[15]Cry2Ab及Cry1Ac杀虫蛋白对棉铃虫中肠蛋白酶活性的影响. 梁革梅,高希武,高珍,张万娜,郭予元. 2012

[16]苏云金芽孢杆菌新型杀虫蛋白基因的研究与开发. 张杰,宋福平,郎志宏. 2005

[17]对Bt蛋白抗性和敏感的棉铃虫中肠细菌群落的比较. 梁革梅,林毅,束长龙,宋福平,张杰. 2010

[18]棉铃虫和粘虫不同组织的氨肽酶活性及与Bt毒蛋白结合特性研究. 潘映红,李国勋,王勤英,吴文君,黄大昉. 2003

[19]对小地老虎具有杀虫毒力的苏云金芽孢杆菌菌株的分离及鉴定. 谷少华,窦黎明,陆琼,张杰,张永军,赵虎基,宋福平. 2007

[20]苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白对棉铃虫活性分析. 宋福平,张杰,赵奎军. 2008

作者其他论文 更多>>