口蹄疫病毒O型和A型交互反应性单克隆抗体的筛选与鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 周莎莎;李坤;王省;曹轶梅;包慧芳;孙普;李冬;李平花;白兴文;付元芳;张婧;马雪青;陈应理;刘在新;卢曾军
作者机构:
关键词: 口蹄疫病毒;抗原结构;单个B细胞抗体技术;单克隆工程抗体;交互反应性
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2020 年 NULL 卷 4 期
页码: 403-411
收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)
摘要: 不同血清型口蹄疫病毒(FMDV)之间不能产生交叉免疫保护,但是血清学的交叉反应确实存在.本研究旨在建立一种筛选型间交互反应性抗体的方法,以期为解析FMDV血清型间保守的抗原结构奠定基础.本方法主要依据单个B细胞抗体技术,首先采用两种不同的荧光染料FluoProbes 647H和Pacific Blue分别标记O型与A型FMDV 146S灭活抗原,然后利用流式细胞分选技术,从免疫牛外周血单个核细胞(PBMCs)中分选出结合两种抗原的特异性B细胞,通过单个B细胞抗体基因测定,获得Ig G抗体重链与轻链可变区编码序列,并将可变区基因插入含有牛IgG抗体恒定区的pcDNA3.4载体中,构建IgG抗体的重链与轻链表达质粒.将重链与轻链表达质粒共转染中国仓鼠卵巢悬浮细胞(CHO-S)进行完整抗体表达.结果显示,通过该方法获得了5株FMDV特异性单克隆抗体,其中4株(H64、R82、I16、R29)经间接免疫荧光(IFA)检测都可特异性识别O和A型FMDV;ELISA结果显示,H64、R82、I16与O、A型抗原均具有较好的亲合力;Western-blot结果显示,I16可特异性结合O、A型FMDV结构蛋白VP2中的线性表位,说明在衣壳蛋白VP2上存在血清型间保守的抗原表位,通过本研究进一步加深了对FMDV抗原结构的认识.
分类号: S852.65
- 相关文献
[1]口蹄疫病毒VP2蛋白特异性单克隆工程抗体的表达与活性鉴定. 王省,李坤,卢曾军,刘在新,李冬,包慧芳,李平花,孙普,白兴文,陈应理,付元芳,张婧,马雪青,曹轶梅. 2019
[2]喹乙醇免疫抗原的合成及评价. 张景艳,李建喜,王磊,杨志强,王学智,张凯,孟嘉仁. 2011
[3]来自不同动物的鹦鹉衣原体株外膜抗原特性的研究. 段跃进,李英才,帅永玉,高双娣,杨学军. 1993
[4]不同储存条件和反复冻融次数对口蹄疫病毒滴度的影响. 孔洁,李亭玉,李太元,常惠芸. 2019
[5]三种大肠杆菌表达的口蹄疫病毒A型多表位蛋白对猪的免疫原性比较. 曹轶梅,王兴凯,王省,李坤,付元芳,李冬,卢曾军,刘在新. 2019
[6]猪源DDX56对口蹄疫病毒的复制及其对病毒诱导的RLR通路调节的研究. 付绍祖,李露露,张敬,李丹,郑海学. 2019
[7]塞尼卡病毒与口蹄疫病毒双重RT-PCR鉴别检测方法的建立. 刘涛,黄元,陈锦良,向华,肖少波,王晓虎,陈晶,向蓉,何继军,郑海学. 2019
[8]口蹄疫病毒结构蛋白VP1容忍外源标签的能力. 李平花,马雪青,寻广谨,白兴文,孙普,袁红,卢曾军,刘在新. 2017
[9]关于英国口蹄疫暴发污染;给全球疫苗研究、生产机构发出的重要警示——生物安全控制的“弦”必须绷紧. 宋立荣. 2008
[10]O型口蹄疫病毒基因重组腺病毒动物免疫试验. 卢曾军,曹轶梅,刘在新,谢庆阁. 2006
[11]搭载飞船的口蹄疫病毒株O/Akesu/58的变异研究. 刘庆军,张永光,王永录,方玉珍,蒋守田,张维德,潘丽,王炜,孙元. 2006
[12]O型口蹄疫病毒OA58株3C基因的克隆与真核表达. 刘萍,丛国正,杨孝朴,沈小燕,邵军军,独军政,林彤,王光华,易华山,常惠芸,谢庆阁. 2007
[13]过硫酸氢钾复合物粉对口蹄疫病毒杀灭效果试验. 乔莉萍,黄银君,薛飞群,张强,周卫,马全鸿,牟克斌,刘学荣. 2013
[14]口蹄疫持续感染机制概述. 马金玲,常惠芸,王雯慧,陈怀涛. 2003
[15]猪源口蹄疫病毒China99/S株基因组全长cDNA的构建及其感染性鉴定. 常艳燕,郑海学,靳野,王光祥,尚佑军. 2009
[16]金丝桃素体外抗口蹄疫病毒与宿主细胞吸附作用研究. 王曙阳,梁剑平,陈积红,崔颖,尚若锋,王学红,华兰英. 2009
[17]用紫外分光光度计检测口蹄疫病毒的研究. 肖昭彭,杨福荣. 2000
[18]RNA干扰抑制口蹄疫病毒复制研究进展. 徐娜,刘明,李宝玉,柳纪省. 2010
[19]口蹄疫病毒China/99基因组RNA序列测定及比较分析. 张显升,刘在新,赵启组,常惠芸,谢庆阁. 2003
[20]重组A型FMDVVP1基因减毒鼠伤寒沙门菌表达质粒的构建及表达. 李婧静,潘丽,张中旺,张永光,吴润. 2016
作者其他论文 更多>>
-
转Bar、dicX基因耐除草剂玉米的创制
作者:李坤;安闯;王云鹏;宋新元;武奉慈;刘艳;翁建峰;李新海
关键词:玉米;遗传转化;转基因耐除草剂玉米;Bar基因;dicX基因
-
稳定表达猪Mx2蛋白的PK-15细胞系构建及鉴定
作者:王彩荷;梁玉斌;孙普;赵志荀;王润泽;李平花;卢曾军;杜晓华;刘霞;马雪青
关键词:II型黏病毒抗性蛋白(Mx2);慢病毒包装;PK-15细胞系;伪狂犬病病毒(PRV)
-
抗口蹄疫病毒IgA抗体的构建表达及其抗病毒活性的分析
作者:刘峰;李坤;章兴赜;马雪青;孙普;李凤娟;曹轶梅;白兴文;付元芳;袁红;欧阳一凡;刘在新;卢曾军;李平花
关键词:口蹄疫病毒;IgA抗体;构建表达;抗病毒活性
-
猪副流感病毒5型HN蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立
作者:倪民婷;张耕馨;孙普;刘光亮;陈佳宁;王金涛
关键词:猪副流感病毒5型;HN蛋白;原核表达;间接ELISA
-
硫酸乙酰肝素生物合成及修饰过程中关键酶的功能研究进展
作者:黄磊;袁红;宫晓华;包慧芳;李冬;李平花;孙普;卢曾军;刘在新;白兴文
关键词:硫酸乙酰肝素;生物合成;合成后修饰;生物学功能
-
一株牛口咽液分离口蹄疫病毒的特性分析
作者:蔡梦婷;袁红;王利豪;杨竞纯;王涛;包慧芳;杨宇轩;孙普;李坤;黄书伦;郭海洋;李平花;卢曾军;何继军;白兴文
关键词:口蹄疫病毒;持续性感染;氨基酸突变;病毒增殖
-
菌酶复合制剂对保育猪生长性能、肠道形态、营养物质消化率及血清免疫指标的影响
作者:吕转平;苏晓月;唐思静;孙普
关键词:菌酶复合制剂;保育猪;生长性能;肠道形态;免疫功能
