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H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Shandong/LY1/2017株反向遗传操作系统的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李梦娇;徐凯;杨彬;刘伟;仇旭升;孙英杰;谭磊;廖瑛;宋翠萍;刘炜玮;张小荣;丁铲;孟春春;吴艳涛

作者机构：

关键词： 禽流感病毒;H9N2亚型;反向遗传

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2020 年 NULL 卷 3 期

页码： 49-54

收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为了构建H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Shandong/LY1/2017的反向遗传操作平台,通过RT-PCR技术分别扩增该毒株的8个基因片段,并分别克隆至双向转录表达载体PHW2000中.8个质粒共转染293T/MDCK混合细胞,96 h后将细胞板反复冻融3次收获细胞悬液,将其接种10日龄SPF鸡胚,96 h后收集尿囊液并将拯救毒株命名为rH9N2,测定其HA效价为1∶256.rH9N2在HA、MDT、EID50、TCID50以及病毒生长曲线、空斑等方面保持了与亲本毒株一致的生物学特性.本研究成功构建了A/Chicken/Shandong/LY1/2017的感染性克隆,为今后通过基因替换、定点突变技术研究H9N2亚型禽流感病毒致病性的分子机制奠定了基础.

分类号： S852.65

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