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肠出血性大肠杆菌O157多重PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 张昕杨;李火明;夏颖;李干武;蔡文通

作者机构:

关键词: 肠出血性大肠杆菌O157;多重PCR;检测

期刊名称:中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2020 年 NULL 卷 4 期

页码: 360-365

收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2020-2021年度) ; 农林核心(2020版) ; 科技核心(2020版)

摘要: 为了建立肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157的多重PCR检测方法,本研究选取调控基因fusR与n5512,联合经典的rfbE、stx1和stx2基因,共同作为靶基因,通过对引物浓度等参数优化,建立了稳定性好的检测EHEC O157的多重PCR方法.并检测了该方法的特异性与敏感性,结果显示,该方法对非O157的产志贺毒素的大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、沙门氏菌、假结核耶尔森菌等检测均为阴性,特异性强;对EHEC基因组DNA的检测下限约为2.27*10-2ng/μL,对EHEC CFU的检测下限约为104cfu/mL.对人工感染菌的样品进行检测,增菌前与增菌后的检测限分别为:饲料,4*103cfu/g和4*10-4cfu/g;土壤,4*103cfu/g和4*10-2cfu/g;牛肉,8*10-1cfu/g和8*10-3cfu/g;废水,4*103cfu/g和4*10-3cfu/g.该方法还能检出感染了EHEC O157小鼠的粪便.综上,本研究建立了一种优化的EHEC O157多重PCR检测方法,为动物养殖与肉品加工过程中EHEC O157的检测提供了便捷、灵敏、可靠的技术手段.

分类号: S852.61

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