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福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的克隆及其原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王松泰;张继瑜;魏小娟;曹小安;邱昌庆

作者机构：

关键词： 福氏志贺菌2a;marA基因;克隆;原核表达

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2008 年 38 卷 06 期

页码： 500-503

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的序列,设计并合成了1对特异性引物,在引物的5′和3′端分别加入含有BamHⅠ和SalⅠ限制性酶切位点的序列,以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板扩增了marA基因序列。将PCR产物与pMD18-T载体连接,转化到大肠杆菌DH5α。鉴定成功获得目的片段后,经BamHⅠ+SalⅠ双酶切并与载体pET-30a连接,构建原核表达质粒pET-30a-marA,并将其转化宿主菌BL21(DE3)pLys,用IPTG诱导其表达。SDS-PAGE分析表明,重组载体pET-30a-marA可成功地在大肠杆菌中表达MarA蛋白。Western-blotting检测证明,该蛋白能与志贺菌阳性血清发生特异性反应。

分类号： S852.61

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