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奶牛隐孢子虫NestedPCR-RFLP方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王权;陈永军;袁耀明;李安平;蒋蔚;朱志宏;安立刚

作者机构：

关键词： 奶牛;隐孢子虫;巢式PCR-RFLP

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN：

年卷期： 2009 年 03 期

页码： 65-72

收录情况： CSCD

摘要： 为快速检测并准确鉴别奶牛隐孢子虫种,以隐孢子虫18SrRNA基因的特殊区域为基础,设计内、外引物,并根据软件分析确定相应的内切酶EcoT14I,采用NestedPCR-RFLP方法进行虫种种型鉴别分析。在NestedPCR两次PCR反应中,以微小隐孢子虫(Cryptosporidiumparvum,C.p)和安氏隐孢子虫(Cryptosporidiumandersoni,C.an)卵囊提取的DNA为模板,均能扩增出长约800bp和500bp的明亮条带,且特异性强,其他虫种不能扩增出条带,该方法最低可检测到5个卵囊/g粪便;对于由内引物扩增出的500bp的条带,C.an的PCR产物能被...

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