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NS2A序列对日本脑炎病毒NS1基因在原核系统中的体外表达的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 仇华吉;金吉东;田志军;周艳君;王云峰;童光志

作者机构：

关键词： 日本脑炎病毒;NS1;NS1';RT-PCR;基因表达

期刊名称：中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2004 年 37 卷 04 期

页码： 614-618

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用RT-PCR扩增并克隆了日本脑炎病毒弱毒株SA14-14-2的NS1、NS1'、NS1-2A的 cDNA片段,分别将其亚克隆到原核表达载体pET-30b(+),构建了重组原核表达质粒pET30b-NS1、pET30b-NS1'、pET30b-NS1-2A,转化大肠杆菌BL-21(DE3),用IPTG诱导培养。结果表明,仅有pET30b-NS1质粒转化的菌株获得表达,而另外2种重组质粒转化的菌株均无表达。表达的融合蛋白分子量约为46kD,约占菌体总蛋白的30.8%,Western blotting分析表明表达产物具有抗原活性。动物试验证实,重组NS1免疫小鼠蛋白可以抵抗强毒的攻击。笔者研究证实NS2A或部分NS2A的存在对于NS1的表达具有不利影响。

分类号： S852.64

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