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抑制消减杂交构建大白猪肺组织抗性相关cDNA文库

文献类型： 中文期刊

作者： 董敏;王立贤;苏振环;程笃学

作者机构：

关键词： 大白猪;肺组织;抗性;抑制性消减杂交;文库

期刊名称：中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集（上册）

ISSN：

年卷期： 2006 年

页码： 5

收录情况： CSCD

摘要： 以大白猪肺部组织为材料,分离Poly(A)+RNA,反转录合成单链及双链cDNA,经酶切成大小为200-500bp的片段,将大白猪病变肺组织cDNA分成2组,分别与接头1、2连接,再与无病变肺组织cDNA进行2次消减杂交和2次抑制性PCR扩增,将第2次抑制性PCR产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞进行文库扩增,构建了具有高消减效率的大白猪肺组织抗性相关cDNA文库。文库扩增后得到422个白色阳性克隆,随机挑选克隆进行PCR鉴定,插入片段主要分布在200-500bp之间。文库的成功构建为进一步筛选、克隆与大白猪肺组织抗性相关的基因奠定了基础,对研究猪肺组织抗性的分...

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