兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达
文献类型: 中文期刊
作者: 哲名家;张淼涛;云涛;王玢瑸;刘光清
作者机构:
关键词: 兔病毒性出血症病毒;岩藻糖基转移酶;原核表达
期刊名称:西北农林科技大学学报(自然科学版)
ISSN: 1671-9387
年卷期: 2012 年 40 卷 04 期
页码: 21-24+30
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】克隆兔岩藻糖基转移酶(FUT2)基因,并进行原核表达,为进一步研究RHDV的感染过程和致病机理奠定物质基础。【方法】从兔肌肉组织中抽提基因组DNA作为模板,PCR扩增出FUT2基因,然后将该基因亚克隆入原核表达载体pET30a中,获得重组原核表达质粒pET30a-FUT2。将该重组原核表达质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot方法对表达产物进行鉴定。【结果】成功克隆了FUT2基因,该基因长度为1 044bp。成功构建了原核重组表达质粒pET30a-FUT2,其诱导表达产物分子质量约为45ku;表达的重组FUT2蛋白可与His标签抗体发生抗原抗体反应。【结论】成功克隆了兔岩藻糖基转移酶基因,获得了分子质量约为45ku的FUT2蛋白。
分类号: S852.659.6
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