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猪源札幌病毒衣壳蛋白的原核表达及免疫原性检测

文献类型： 中文期刊

作者： 杨勃;兰喜;杨彬;柳纪省;单兴娜

作者机构：

关键词： 猪;札幌病毒;衣壳蛋白;原核表达

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 12 期

页码： 1273-1278

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得猪源札幌病毒(SaV)衣壳蛋白(VP1),以SaV CH430株的RNA为模板,采用RT-PCR扩增VP1基因;将其克隆到原核表达载体pET-30a中,并将成功构建的原核表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。结果显示,获得的VP1基因全长为1 635bp,编码545个氨基酸。SDS-PAGE结果显示,目的条带大小为63ku,与预期结果相符。重组菌在37℃、IPTG终浓度为0.8mmol/L、诱导表达6h时重组蛋白的表达量达到最大值,表达的目的蛋白主要以包涵体的形式存在。将纯化的VP1重组蛋白免疫家兔,得到了超免疫血清。Western-blot分析表明,该重组蛋白与超免疫血清具有良好的反应原性。上述试验结果为深入研究VP1蛋白的功能和研制ELISA诊断试剂盒奠定了基础。

分类号： S852.651

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