共表达O型口蹄疫病毒P12A+3C基因的重组杆状病毒的构建
文献类型: 中文期刊
作者: 田飞鹏;曹轶梅;卢曾军;孙普;高云英;刘在新
作者机构:
关键词: 口蹄疫病毒;衣壳蛋白;重组杆状病毒;构建
期刊名称:华北农学报
ISSN: 1000-7091
年卷期: 2010 年 25 卷 01 期
页码: 1-5
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 构建共表达O型口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus,FMDV)衣壳蛋白前体P12A和蛋白酶3C的重组杆状病毒,为进一步研究FMDV空衣壳抗原和基因工程亚单位疫苗奠定基础。从质粒T-OP1中扩增出编码O型FM-DV衣壳蛋白前体的P12A基因,并将其插入到杆状病毒转移载体pFastDual-3C的PH启动子之下,构建重组杆状病毒转移载体pD-P12A3C。通过在大肠杆菌内转座重组,获得重组杆粒B-P12A3C,转染Sf9细胞,获得表达O型FMDV衣壳蛋白的重组杆状病毒。重组杆状病毒经增殖并感染Sf9细胞后,通过双抗体夹心ELISA方法及间接免疫荧光来检测目的蛋白的表达。结果表明,表达产物能被O型FMDV阳性血清识别,具有一定的反应原性,表明重组杆状病毒构建成功,该研究为O型FMDV空衣壳的体外组装及基因工程亚单位疫苗的研究提供了前期材料。
分类号: S852.65
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