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兔出血症病毒VPg蛋白的原核表达及抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 王玢瑸;哲名家;刘光清;张淼涛

作者机构：

关键词： VPg;原核表达;多克隆抗体

期刊名称：西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2013 年 41 卷 03 期

页码： 45-49

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建重组兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)VPg(Viral Protein Ge-nome-Linked,VPg)蛋白基因的原核表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达和纯化VPg蛋白,制备多克隆抗体,并检测抗体的基本特性。【方法】用PCR方法扩增RHDVVPg基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导,使之重组表达VPg蛋白,并用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白。PCR扩增获得了345bp的VPg基因,用纯化的重组VPg蛋白免疫试验兔,制备抗VPg的多克隆抗体,用Western blot检测其特异性。【结果】构建了pET-30a/VPg原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株后,成功表达了VPg蛋白。用该蛋白免疫试验兔后,制备的多克隆抗体能与VPg蛋白特异性反应。【结论】成功表达了RHDV VPg蛋白,并制备了特异性良好的多克隆抗体。

分类号： S852.659.6

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